人妻少妇精品专区性色av,国产亚洲日韩一区二区三区,久久久久久亚洲精品无码,久久强奷乱码老熟女网站

產(chǎn)品列表 / products

首頁 > 技術(shù)文章 > 液氮超低溫凍結(jié)法詳細操作步驟

液氮超低溫凍結(jié)法詳細操作步驟

點擊次數(shù):4904 更新時間:2017-06-06

液氮超低溫保藏技術(shù)是將菌種保藏在-196℃的液態(tài)氮,或在-150℃的氮氣中的長期保藏方法,它的原理是利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。

操作步驟如下:

1、安瓿管或凍存管的準(zhǔn)備

用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料凍存管。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈, 121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。

2、保護劑的準(zhǔn)備

保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,應(yīng)注意其濃度,一般采用10-20%甘油。

3、微生物保藏物的準(zhǔn)備

微生物不同的生理狀態(tài)對存活率有影響,一般使用靜止期或成熟期培養(yǎng)物。

分裝時注意應(yīng)在無菌條件下操作。

菌種的準(zhǔn)備可采用下列幾種方法: 刮取培養(yǎng)物斜面上的孢子或菌體,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);

接種液體培養(yǎng)基,振蕩培養(yǎng)后取菌懸液與保護劑混合分裝于凍存管內(nèi);

將培養(yǎng)物在平皿培養(yǎng),形成菌落后,用無菌打孔器從平板上切取一些大小均勻的小塊(直徑約5-10毫米),真菌取菌落邊緣的菌塊,與保護劑混勻后加入凍存管內(nèi);

在小安瓿管中裝1.2-2毫升的瓊脂培養(yǎng)基,接種菌種,培養(yǎng)2-10天后,加入保護劑,待保藏。

4、預(yù)凍

預(yù)凍時一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結(jié)到-35℃。

目前常用的有三種控溫方法:

—— 程序控溫降溫法,應(yīng)用電子計算機程序控制降溫裝置,可以穩(wěn)定連續(xù)降溫,能很好地控制降溫速率。

—— 分段降溫法:將菌體在不同溫級的冰箱或液氮罐口分段降溫冷卻,或懸掛于冰的氣霧中逐漸降溫。一般采用二步控溫,將安瓿管或塑料小管,先放-20℃至-40℃冰箱中1-2小時,然后取出放入液氮罐中快速冷凍。這樣冷凍速率大約每分鐘下降1-1.5℃。

—— 對耐低溫的微生物、可以直接放入氣相或液相氮中。

5、保藏

將安瓿管或塑料凍存管置于液氮罐中保藏。一般氣相中溫度為-150℃,液相中溫度為-196℃。

6、復(fù)蘇方法

從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

15611258074
在線咨詢
欧美亚洲精品SUV| 国产免费AV片无码永久免费| 国产男男激情VIDEOSGAY| 一本一本久久a久久精品综合麻豆| 777午夜精品久久AV蜜臀| 欧美性XXXXX极品| 极品尤物一区二区三区| 野花免费高清完整在线观看| 无码人妻精品一区二区三区66 | 护士人妻hd中文字幕| 综合 欧美 亚洲日本| videosgrstv欧美| 国产人妻高清国产拍精品| 老色69久久九九精品高潮| 车后座挺进朋友人妻女友| 97精品国产97久久久久久免费| 国内精品伊人久久久久777| 人妻~夫の上司犯感との| 久久99国产精品久久99果冻传媒| 国精品午夜福利视频不卡| 日本精品无码一区二区三区久久久| 人人妻人人澡人人爽人人精品浪潮| 日本一本免费一区二区| 亚洲精品无码久久毛片| 丝袜 亚洲 另类 欧美 变态| 国内精品一区二区三区亚洲熟女乱综合一区二区| 无码人妻一区二区三区免费N鬼沢| 欧美毛片又粗又长又大电影| 麻豆久久国产亚洲精品超碰热| 好吊视频一区二区三区| 日韩内射美女人妻一区二区三区| 久久久国产精品无码一区二区| 欧美xxxx做受欧美| 国产成人亚洲精品| 青青河边草免费视频观看| 乱码丰满人妻一二三区| 国产精品ⅴ无码大片在线看| 成人免费a级毛片无码片| 久久婷婷五月综合色精品| 8X福利精品第一导航| 中国CHAIN同志GAY片国产|